鞘流階梯乳化數(shù)字液滴 PCR 技術(shù)
發(fā)布時(shí)間：2023-07-19 15:46:20 人氣：822
一種基于單層光刻技術(shù)的鞘流階梯乳化（CFSE）器件，用于生成高密度液滴陣列，實(shí)現(xiàn)片上多重?zé)晒鈹?shù)字PCR。 該技術(shù)的主要優(yōu)勢有兩點(diǎn)：一是基于單層光刻工藝實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)上雙層光刻工藝才能解決的階梯乳化液滴生成功能；二是無需提取油相，液滴生成后，存儲腔中內(nèi)相流體（PCR反應(yīng)體系）的體積占比可高達(dá)72%，為構(gòu)建高密度的液滴陣列、保留后續(xù)檢測單元集成的預(yù)留空間提供了解決方案。 此外，該器件在重復(fù)性、穩(wěn)定性、檢測精確性等方面也表現(xiàn)出了優(yōu)異性能。
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一種可重復(fù)使用的微流體芯片，該芯片基于階梯乳化（Step Emulsification）產(chǎn)生納升液滴陣列，用于同時(shí)對8個(gè)樣品進(jìn)行片上多重?zé)晒鈹?shù)字PCR。 裝置包含兩塊玻璃板，可實(shí)現(xiàn)預(yù)先填充礦物油的快速組裝。 通過由單個(gè)壓力泵同時(shí)驅(qū)動(dòng)8個(gè)樣品通道的階梯乳化，利用噴嘴陣列快速產(chǎn)生液滴，生成的液滴在U形腔室中可自組裝成單層液滴陣列，每個(gè)腔室可容納約10000個(gè)0.35 nL體積的微滴。 系統(tǒng)采用的油相配方有效避免和消除了數(shù)字PCR溫控過程中氣泡的產(chǎn)生，在熱循環(huán)期間不需要采用過壓控制。 團(tuán)隊(duì)將該芯片應(yīng)用于臨床樣本HER2拷貝數(shù)變異的定量評估，驗(yàn)證了多重?cái)?shù)字PCR性能。
參考文獻(xiàn)：
[1]A reusable microfluidic device for generating droplet arrays for digital PCR based on step emulsification.
[2]Development and Application of Digital PCR Technology.
[3]Easy-to-Operate Co-flow Step Emulsification Device for Droplet Digital Polymerase Chain Reaction.
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